微生物的长期保存是一个挑战,生物需要低温贮存并尽量提供最少干扰的可能性。然而,Microbank™提供了一种保存液来应对对这个问题。
用途
标记颜色的25 个小珠被包装容纳在包含保存剂的保存管里,小珠被冲洗和吸附细菌在上面,之后保存管在贮存期内保持在-70°C,当需要培养,单个小珠很简单的移出保存管,并直接划线在微生物培养基上。
操作步骤
A.准备
1.使用一个准备的标签,管上条码,每管接种一个生物。(也可以看步骤6)。
2.在无菌的条件下打开小管的盖。
3.将纯培养的小菌落(18-24h 培养)挑取3-4 个麦氏管缓冲液接种到液体保存剂中。
4.盖好瓶盖并颠倒4-5 次以吸附微生物,不要旋涡。
5、此时微生物将被吸附到小珠,这缓冲液需倒掉使接种小珠尽可能无液体,盖上瓶盖。
6、在瓶上提供的培养条码做下记录或其它的记录。
7、贮存接种的冻存管在-70℃为了长期效果。
B.复苏
1、在无菌的条件下,打开瓶盖并使用灭菌的接种棒或镊子移出一个小珠,盖好瓶盖并尽快放回低温保存。过度改变温度会减少生物生存能力。
2、小珠能被直接使用接种在固体培养基或可滴入在合适的液体培养基。
3、当作推存使用,每个保存管大概保存25 次相同可能培养数。
局限性
1、Microbank™为生物长期保存可能完全提供一种方法。
2、在使用中,无菌技术必须熟练以继续保证微生物的完整
3、Microbank™在接种之前以下条件不能被使用:
a.管显示任何泄漏的迹象(冻存管破损)。
b.冻存管存在污染。
c.已经超出标记的有效期。
4、无论如何小珠移出后不能放回冻存管。
5、Microbank™提供了不同的颜色,这些颜色提供颜色识别便利并没有意味产品功能的任何改变。
安全预防
1.当操控危害的培养物需使用一个生物安全柜。
2.当抛弃使用或部分使用冻存管注意生物危害预防。
3.当保存Microbank™在液氮里。以下需注意:
a.保证保存管盖正常旋紧:过于绷紧可扭曲帽里面的硅树脂橡胶密封件引起泄漏。
b.保证保存管在盖之前螺纹与盖是完全干燥的:液滴在液氮将损害封口。
c.所有Microbank™ 保存管需经常保存在气相,在液氮上面。如浸入,当回到室温时他们可以发展裂缝或破碎。
d.当从液氮罐移出保存管应使用安全器材如:手套、防护面罩等
包装:
Microbank™的包装每盒80 支。
贮存:
使用之前,未使用的Microbank™可以贮存在4°C 或在室温但避免直射光。贮存在这些Microbank™可以在产品标记的有效日期内使用。
参考
1. White and Sand, R.L. 1985. Medical Laboratory Sciences 42:289-290 (U.K.)China +86(21)33502802
2. Feltham et al. 1978. Journal of Applied Bacteriology.44:313-316.
3. Nagel, J.G. & Cunz, L.J. 1971. Applied Microbiology.23(4):837-838.2003 12.